DNA的合成

τςο λεψτθρε ρεμαινσ το με στθδυ.

• 端粒：指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构
• 端粒的功能: 补偿染色体复制的末端隐缩，防止染色体DNA降解、末端融合、非正常重组，从而保证了染色体的完整 性和稳定性，使真正的遗传信息得到完整复制
• 端粒的结构特点：由末端重复不对称DNA序列和蛋白质构成，末端序列是多次重复富含G碱基的短序列
  • 端粒最早在四膜虫中被发现，四膜虫端粒5’-GGGGTTGGGGTT-3’
  • 人类端粒重复序列是5’-TTAGGG-3’，重复次数不固定，端粒酶越活跃重复次数越多

端粒酶 Telomerase

• 组成：RNA+蛋白质
• 作用：作为逆转录酶，以RNA作模板，合成端粒DNA片段
• 作用机制：爬行模型

端粒、端粒酶与衰老和肿瘤

• 体细胞中，年老个体的端粒比年轻个体的短
• 体细胞中端粒酶活性低或无
• 胚胎细胞、生殖细胞、造血干细胞等端粒酶活性高（增殖快）
• 85％以上的癌细胞具有端粒酶活性

真核生物DNA复制概况

• 复制分为起始、延伸和终止三个阶段
• 多个复制起始点形成多个复制子，复制起始点往往富含AT碱基
• 复制中多种蛋白的作用类似原核DNA复制所需蛋白，但机制更为复杂
• 复制过程涉及核小体的解聚和重新生成，后随链中冈崎片段的长度就是一个核小体所含的DNA片段长度
• 线性DNA末端复制的问题由端粒和端粒酶解决

真核生物线粒体DNA按照D环方式复制

• mtDNA为闭合环状双链结构，第一个引物以内环为模板延伸，致第二个复制起点时，又合成另一个反向引物，以外环为模板进行反向延伸
• D环复制的特点是复制起点不在双链DNA同一位点，内外环复制有时序差别
• mtDNA容易发生突变，损伤后的修复较困难

逆转录 REVERSE TRANSCRIPTION

• 以RNA为模版、四种dNTP为原料，在引物的3’端以5’－3’方向合成与RNA互补的DNA链的过程
• aka反转录
• 逆转录酶的作用
  1. 以viral-RNA为模版合成互补DNA链&viral-RNA 互补双链
  2. 降解viral-RNA形成viral- RNA的单链互补链DNA
  3. 以DNA为模版合成互补的DNA双链 viral-DNA - 特点：无外切酶活性，转录错误率高（2X10-4）（突变多、抗病毒/抗菌）
• 逆转录作用的研究意义
  • 补充了中心法则，说明RNA同样兼有遗传信息传代与表达功能
  • 加深了对RNA病毒致病、致癌的认识
  • 第一个被发现的逆转录病毒是Rous肉瘤病毒，HIV是逆转录病毒
  • 利用逆转录酶，进行基因操作，制备cDNA（RNA易降解、不稳定；cDNA相对稳定）

final

1. DNA复制的基本规律
2. DNA复制的酶学和拓扑学
3. 原核生物DNA复制过程
4. 真核生物DNA复制过程
5. 逆转录

DNA复制研究进展：DNA复制时机决定致癌染色体易位发生

DNA复制研究进展；染色体外DNA（ecDNA）

染色质外的ecDNA在DNA复制过程中如何保留？